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DO Supplement-Leu/-Trp
  • 產(chǎn)品貨號:
    BN25174
  • 中文名稱:
    DO Supplement-Leu/-Trp
  • 品牌:
    Biorigin
  • 貨號

    產(chǎn)品規(guī)格

    售價

    備注

  • BN25174-20g

    20g

    ¥498.00

    DO雙缺氨基酸

產(chǎn)品描述

一、酵母培養(yǎng)基種類及用途 

一缺培養(yǎng)基 

     用于單質粒酵母轉化篩選,外源基因在酵母中的表達、異源基因功能互補、酵母單雜交和酵母雙雜交初始質粒轉化。 

二缺培養(yǎng)基 

     用于雙質粒酵母轉化篩選,外源基因在酵母中的表達、異源基因功能互補、酵母單雜交和酵母雙雜交初始質粒轉化免疫共沉淀,Y187、AH109/Y2HGold、NMY51 酵母雜交實驗, 接合型二倍體篩選。 

三缺培養(yǎng)基 

     用于雙質粒酵母轉化篩選和報告基因檢測,外源基因在酵母中的表達、異源基因功能互 補、酵母單雜交和雙雜交報告基因檢測,Y187、AH109/Y2HGold、NMY51 酵母交配實驗后報 告基因分析(His3,Ade2)。 

四缺培養(yǎng)基 

     用于報告基因分析,酵母雙雜交和酵母三雜交報告基因檢測,Y187、AH109/Y2HGold、NMY51 酵母交配實驗后報告基因分析(His3,Ade2)。 

五缺培養(yǎng)基 

     用于報告基因分析和表型分析,酵母三雜交報告基因檢測(His3,Ade2)、酵母營養(yǎng)缺 陷型分離鑒定和表型分析。 

六缺培養(yǎng)基 

     用于報告基因分析、表型分析和藥物毒理分析,酵母三雜交報告基因檢測、酵母營養(yǎng)缺 陷型分離鑒定和表型分析、藥物毒理分析。

Rich medium 

     Rich medium 包括 YPD、YPDA、YPD Plus 系列培養(yǎng)基,也可以稱為完全培養(yǎng)基。 YPD Medium 由精選的蛋白胨、酵母提取物和葡萄糖按適當比例混合組成;YPDA 培養(yǎng)基是 在 YPD 培養(yǎng)基中添加了適量的硫酸腺嘌呤;YPD Plus 相比于 YPDA 的營養(yǎng)更為豐富, 可直接用于釀酒酵母感受態(tài)的復蘇,可以提高轉化效率。YPD Agar、YPDA Agar 分別在 YPD、YPDA 基礎上加入了 Agar,作為固體培養(yǎng)基倒板用。YPD 系列培養(yǎng)基用于釀酒酵母 的常規(guī)培養(yǎng)。

二、酵母培養(yǎng)基的配制 

(1) Rich Liquid Media (Broth) 

     1. 取 50g 的 YPD/YPDA 加 1L 的去離子水中溶解; 

     2. 調節(jié) pH 至 6.5,121℃高壓滅菌 15min; 

     3. 避光、室溫條件下儲存滅菌培養(yǎng)基。 

(2) Rich Plating Media with Agar 

     1. 取 70g 的 YPD Agar/YPDA Agar 加 1L 的去離子水中溶解(瓊脂在高溫滅菌后溶解); 

     2. 調節(jié) pH 至 6.5,121℃高壓滅菌 15min; 

     3. 冷卻到 50℃把培養(yǎng)基倒入平板中,室溫使其凝固,封口膜封好后倒置保存在 4℃冰箱。

(3) Minimal SD Base 

     1. 在 1L 去離子水中加入 26.7g 的 Minimal SD Base,然后再加入相應量的缺陷氨基酸, 攪拌溶解; 

     2. 調節(jié) pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min; 

     3. 避光、室溫條件下儲存滅菌培養(yǎng)基。 

(4) Minimal SD Agar Base 

     1. 在 1L 去離子水中加入 46.7g 的 Minimal SD Base,然后再加入相應量的缺陷氨基酸, 攪拌溶解; 

     2. 調節(jié) pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min; 

     3. 冷卻到 50℃把培養(yǎng)基倒入平板中,室溫使其凝固,封口膜封好后倒置保存在 4℃冰箱。

(5) DO(缺陷氨基酸)類培養(yǎng)基的配制 

     1. 在 1L 去離子水中加入相應量的 DO 培養(yǎng)基,然后再加入 26.7g Minimal SD Base,攪拌 溶解; 

     2. 調節(jié) pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min; 

     3. 4℃冰箱避光儲存已經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基。

     或:1. 在 900ml 去離子水中加入相應量的 DO 培養(yǎng)基,然后再加入 6.7g YNB,攪拌溶解; 

     2. 調節(jié) pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min;

     3. 4℃冰箱避光儲存已經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基; 

     4. 使用時再加入 100ml 已滅菌的 20%葡萄糖。

(6) SC(缺陷氨基酸+YNB)類培養(yǎng)基的配制

     1. 在 1L 去離子水中加入相應量的 SC 培養(yǎng)基,然后再加入 20g 葡萄糖,攪拌溶解; 

     2. 調節(jié) pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min; 

     3. 4℃冰箱避光儲存已經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基;

     或:1. 在 900ml 去離子水中加入相應量的 SC 培養(yǎng)基,攪拌溶解; 

     2. 調節(jié) pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min; 

     3. 4℃冰箱避光儲存已經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基; 

     4. 使用時再加入 100ml 已滅菌的 20%葡萄糖。 

(7) SD(缺陷氨基酸+YNB+葡萄糖)類培養(yǎng)基的配制 

     1. 在 1L 去離子水中加入相應量的 SD 培養(yǎng)基,攪拌溶解; 

     2. 調節(jié) pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min; 

     3. 4℃冰箱避光儲存已經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基。 

(8) SD with Agar(缺陷氨基酸+YNB+葡糖糖+Agar)類培養(yǎng)基的配制 

     1. 在 1L 去離子水中加入相應量 SD with Agar 培養(yǎng)基,攪拌溶解(瓊脂在高溫滅菌后溶解);

     2. 調節(jié) pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min;

     3. 冷卻到 50℃把培養(yǎng)基倒入平板中,室溫使其凝固,封口膜封好后倒置保存在 4℃冰箱。

注意事項: 

     1. 在配制酵母缺陷培養(yǎng)基時,培養(yǎng)基會變色,由淺黃到深褐色不等,對酵母的生長不會產(chǎn) 生嚴重影響。 

     2. DO 類和 SC 類培養(yǎng)基均不含葡萄糖。葡萄糖高溫滅菌會有碳化現(xiàn)象,控制好滅菌溫度和時間,葡萄糖的微量碳化對實驗并無太大影響。如有特殊要求可將 20%葡萄糖單獨滅菌,待使用時再加入。

     3. 缺陷培養(yǎng)基的 PH 值在 5.5-6.5 范圍內都是比較適合酵母生長的,此類試劑粉末的 PH 已 經(jīng)過調試,使用時只需要稍微調整即可。


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