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應(yīng)用范圍：核酸染色

貯存條件： 4℃避光保存

產(chǎn)品參數(shù) 

外觀：可溶于 DMSO 和 MeOH 的紅色固體 

λEx/λEm = 528/617 nm(結(jié)合 DNA) 

λEx/λEm = 493 nm(未結(jié)合 DNA) 

保質(zhì)期：12 個(gè)月 

CAS 號(hào)：61926-22-5 

分子式：C46H50Cl4N8 

分子量：857 

分子結(jié)構(gòu)圖：

產(chǎn)品介紹 

Ethidium Homodimer-I (EthD-I)是一種高親和性的熒光核酸染料，與 DNA 或 RNA 結(jié)合后，可以使熒光增強(qiáng) 30 多倍。用于哺乳動(dòng)物、細(xì)菌、酵母和真菌的染色。Ethidium Homodimer-I (EthD-I)帶有較強(qiáng)正電荷，所以該染料不能穿過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)行活細(xì)胞染色。但是 EthD-I 可以準(zhǔn)確的檢測(cè)溶液中的核酸或者解體細(xì)胞中的核酸，是一種較靈敏的核酸染色劑。

使用方法 

注：該操作說(shuō)明適用于大多數(shù)細(xì)胞，但不同的細(xì)胞類型、細(xì)胞密度、使用的培養(yǎng)基以及其他一些因素都有可能影響染色效果，本說(shuō)明僅供參考。

1. 儲(chǔ)存液的制備：取適量DMSO加入到Ethidium Homodimer-I中，配制成2mM儲(chǔ)液，該儲(chǔ)存液可于-20℃穩(wěn)定保存一年。

2. 將20μl 2mM儲(chǔ)液加入到10ml無(wú)菌的組織培養(yǎng)級(jí)別的 D-PBS中，充分渦旋混勻，使其終濃度為4μM（推薦濃度為 0.1-10μM，不同細(xì)胞系建議梯度設(shè)置確定最佳染色濃度）。

3. 吸取上述配置好的工作液100-150μl加入到細(xì)胞蓋玻片上使其完全覆蓋。孵育最好是在含有蓋子的盤(pán)子里防止染色液揮發(fā)。

4. 室溫孵育30-45min，若染色液濃度過(guò)高或溫度過(guò)低可適當(dāng)減少孵育時(shí)間。 

5. 向一個(gè)新的顯微鏡載玻片上加入10μl D-PBS。 

6. 使用尖鑷子小心且迅速將載有細(xì)胞的蓋玻片倒置加在含有D-PBS的載玻片上，為了防止染色液揮發(fā)，用干凈透明的指甲油封住載玻片四周。 

7. 在熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞染色情況。

注意事項(xiàng) 

1. 熒光染料均存在淬滅問(wèn)題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。 

2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。